Human MRP4 Vesikel-Kit – Inside-Out-Membranvesikel für renale proximale Tubuli und Nukleotid-Transportstudien

Das Human MRP4 Vesikel-Kit (HEK293-abgeleitet) liefert gebrauchsfertige Inside-Out-Membranvesikel für ATP-abhängige Transportstudien von MRP4 (ABCC4). MRP4 wird in renalen proximalen Tubuli, Hepatozyten, Thrombozyten und der Blut-Hirn-Schranke exprimiert. Es verarbeitet ein breites Spektrum an Substraten einschließlich zyklischer Nukleotide, Prostaglandine, Urat und nukleotidanaloger antiviraler und onkologischer Arzneimittel — was es besonders wichtig für die renale DDI-Risikobewertung und antivirale Arzneimittelentwicklung macht.

Transporterprofil

MRP4 (ABCC4) transportiert zyklische Nukleotide (cAMP, cGMP), Prostaglandine, Urat, Glutathionkonjugate und Nukleotidanaloga. Es wird in der apikalen Membran des renalen proximalen Tubulus (beiträgt zur renalen Ausscheidung), der hepatischen basolateralen Membran und Thrombozyten (reguliert Thromboxan-A₂/cAMP-Signaling) exprimiert. Wichtige Substrate: PMEA (Adefovir), Methotrexat, cAMP, cGMP, Leucovorin. Besonders relevant für antivirale Nukleosidanaloga (Tenofovir, Adefovir, Cidofovir).

Technische Spezifikationen

Anwendungsgebiete

Assay-Prinzip

Inside-Out-Membranvesikel präsentieren die zytoplasmatische Seite des Transporters dem Assaypuffer und ermöglichen so ATP-abhängige Substrataufnahme in das Vesikelinnere. Vesikel mit Testverbindung und Probesubstrat in Gegenwart von ATP (Transport) oder AMP (Hintergrundkontrolle) inkubieren. Reaktion mit kaltem Waschpuffer stoppen, Vesikel durch Filtration trennen und akkumuliertes Substrat per LC-MS/MS, Radiolabel oder Fluoreszenz quantifizieren. Das ATP/AMP-Verhältnis bestimmt das Assay-Fenster für die zuverlässige IC₅₀-Bestimmung.

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Häufige Fragen

Ist MRP4 für bestimmte Arzneimittelklassen besonders relevant?

Ja — MRP4 ist am wichtigsten für: (1) Nukleotidanaloge Antivirale (Tenofovir, Adefovir, Cidofovir), wo renales MRP4 Ausscheidung und DDI-Risiko vermittelt, (2) NSAIDs und COX-Inhibitoren über Prostaglandin-Efflux, und (3) Methotrexat und Antifolate.